| 产品描述 | FectinMore™ mRNA-Xpert转染试剂是专门设计用于将mRNA转入哺乳动物细胞，具有极小的细胞毒性。通过将mRNA直接递送到细胞质，它绕过了转录调控，实现了即时表达。这种方法还避免了基因整合的风险，从而最大限度地减少了与质粒DNA相关的突变的可能性。 |
| 产品形式 | 液体 |
| 产品应用 | mRNA Transfection |
mRNA转染细胞实验FectinMore™推荐用量：
| 培养板/皿 | 生长面积（cm²/孔） | 每孔总体积 | mRNA量/无血清培养基 | FectinMore™量/无血清培养基 |
|---|---|---|---|---|
| 96孔板 | 0.3 | 100 μL | 250 ng/10 μL | 0.75 μL/10 μL |
| 24孔板 | 2 | 500 μL | 500 ng/25 μL | 1.5 μL/25 μL |
| 12孔板 | 4 | 700 μL | 750 ng/35 μL | 2.25 μL/35 μL |
| 6孔板 | 9.5 | 1mL | 1 μg/50 μL | 3 μL/50 μL |
| 60mm培养皿 | 20 | 3mL | 2.5 μg/150 μL | 7.5 μL/150 μL |
| 100mm培养皿 | 60 | 6 mL | 5 μg/300 μL | 15 μL/300 μL |
操作步骤 (依据上表以24孔板为例)
1. 准备待转染细胞：按照贴壁细胞5×10^4 /孔、悬浮细胞1.5-2.5×10^4 /孔的密度接种于24孔板中，37 ℃培养16-20小时，细胞汇合度达到70%左右可进行转染操作。
2. 转染前30分钟，将待转细胞更换新鲜无血清或有血清培养基。更换的培养基需预先平衡至室温或37 ℃。
3. 准备FectinMore™/mRNA复合物：将0.5μg mRNA溶于25μL无血清培养基中混匀；将1.5μL FectinMore ™加入另外25μL无血清培养基中混匀。室温5分钟后，将后者加入前者中混匀，得到的50μL 复合物室温孵育10-15分钟。
4. 转染：将上述FectinMore™/mRNA复合物加入每孔细胞（无血清或有血清细胞培养基450μL），复合物占总体积的1/10，轻柔摇匀。37℃孵育6-24小时。移除培养基，进行显像/分析转染细胞或添加新鲜培养基继续培养。
注意事项：
1) mRNA纯度建议A260/A280=1.9-2.0。
2) 转染时使用的培养基推荐使用Gibco™ Opti-MEM™ I Reduced-Serum Medium或Gibco™ OptiPRO™ SFM培养基。
3) FectinMore™/mRNA复合物混匀操作需充分。
| 储存 | -20℃，有效期一年 |
| 运输 | 蓝冰 |
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Transfection: Cells were transfected with 500 ng of GFP mRNA (left) or mCherry plasmid (right) using two different transfection reagents.The upper row shows results using FectinMore™ Transfection Reagent, with strong fluorescence for mCherry, indicating high transfection efficiency for plasmid. The lower row shows results using FectinMore™ mRNA-Xpert Transfection Reagent, which exhibits significantly stronger GFP (green) fluorescence. Bright-field images are shown alongside fluorescence images to visualize cell 500 ng GFP mRNA morphology. |
暂无参考文献
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