Q：重组细胞因子如何溶解和分装储存？

A：乔默生物重组细胞因子均为冻干粉，客户收到产品后我们承诺-20℃~-80℃ 可保存一年。

收到产品后开封前，强烈建议在开盖前先进行离心，以便使可能因运输脱落粘附在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底。具体使用流程如下：

Step 1．离心：未开封前，低速离心 (3000-3500 rpm) 5 分钟。

Step 2．溶解：

严格使用说明书上指定溶液进行溶解，溶解浓度控制在 100-200 μg/mL。溶解时不可涡旋震荡，剧烈震荡会导致其化学键的断裂，从而造成细胞因子失活。为保证实现细胞因子的完全溶解，可在加入适当的溶液后轻摇或用移液枪的枪头轻吹几下，并室温（25℃左右）静置 20 min，勿置于冰上或4℃，待细胞因子完全溶解后使用。

Step 3. 稀释后分装保存

1. 稀释：冻干粉细胞因子溶解后请即用乔默随货提供的含 5% 海藻糖的PBS溶液（pH＝7.2）进行稀释，浓度不低于10 μg/mL。

2. 分装和储存：稀释后的细胞因子，分装时每管中工作液的体积建议为单次实验的用量，分装的体积最好大于20 μL，此操作可避免吸附带来的细胞因子损失。分装好后需冻存于 -20℃~-80℃，有效期为 3-6 个月（指标不同有效期略有差异，但均不短于 3 个月）。需避免反复冻融引起细胞因子活性的降低。任何一次冻融循环都会引起细胞因子活性的降低。

* 乔默重组细胞因子溶解后在2-8℃仅能存储1周，故如需长期保存，则需严格按照说明用乔默生物随货提供的含5%海藻糖的PBS溶液（pH=7.2）进行稀释并分装保存于-20℃~-80℃。

* 配置成实验工作浓度的重组细胞因子不建议存放于4℃一段时间后再使用，低浓度细胞因子稳定性不佳，4℃存放时间过长会导致细胞因子活性会大幅降低。强烈建议配置成工作液后现配现用。

Q：重悬后高于或低于该浓度范围可以吗？

A：不建议。过高或过低的浓度会导致细胞因子不稳定，即很容易出现活性下降的现象。高于这个浓度范围，可能会超过该细胞因子的最大溶解浓度，加入的溶液无法完全溶解细胞因子，影响后续细胞因子活性。此外，高于或低于该浓度范围，细胞因子都可能会出现聚集，最终结果还是部分细胞因子未溶解，导致细胞因子活性的减弱。

Q：载体蛋白有哪些？

A：0.1% BSA，10% FBS(胎牛血清)，5% HSA(人血清白蛋白)，5% 海藻糖，四者选其一。乔默生物随货提供含5%海藻糖的PBS溶液（pH=7.2）作为蛋白稳定溶液。

Q：含载体蛋白的溶液指的是什么溶液呢？水可以吗？

A：为了维持一定的 pH 值跟盐类浓度，避免蛋白不稳定，该溶液通常建议选择 pH 近中性、有一定缓冲能力的缓冲液，乔默生物随货提供含 5% 海藻糖的PBS溶液（pH=7.2）作为蛋白稳定溶液。不建议用水作为载体蛋白溶液。

Q：有人会在重组细胞因子冻干粉用推荐溶液重悬后直接分装冻存于-20℃至-80℃，这样可以吗？

A：不可以。塑料管壁对多数蛋白均有很好的吸附作用，也就是说溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。粘附后，蛋白是很难与管壁分离的。我们所熟悉的 ELISA 实验中包被抗体/抗原就是通过这种粘附作用包被到酶标板上的。

载体蛋白，如 0.1% BSA、10% FBS、5% HSA 和 5% 海藻糖的主要作用是封闭塑料管壁上的蛋白结合位点，使细胞因子不会粘附于管壁。如果在细胞因子冻干粉用推荐溶液重悬后，不用含载体蛋白的溶液进一步稀释，而是直接分装冻存，则溶液中的大部分细胞因子均会粘附到管壁上，导致溶液中实际溶解的细胞因子的浓度大大降低，最终表现为细胞因子活性的下降。此外，载体蛋白也能维持细胞因子在低温条件下的稳定，使其保持活性。

因此，溶解后一定要用乔默生物随货提供的含 5% 海藻糖的 PBS 溶液（pH=7.2）进行稀释后分装保存于 -20℃。