背景描述 | Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料 iFluor488(Ex:488nm,Em:514nm),利用流式细 胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。PI 是一种细胞核染料,搭配 Annexin V 使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 |
产品应用 | Apoptosis Assays |
储存 | 4℃避光,有效期两年 |
运输 | 蓝冰 |
试剂盒组分 | CM001-50D | CM001-100D |
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Annexin V-iFluor 488 |
1 × 0.25 mL |
1 × 0.5 mL |
PI Solution |
1 × 0.25 mL |
1 × 0.5 mL |
10×Binding Buffer |
2 × 2 mL |
3 × 2 mL |
本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本):
流式细胞实验操作步骤:
1. 悬浮细胞离心(2000 rpm 离心 5 分钟)收集;贴壁细胞用不含 EDTA 的胰酶消化收集。
2. 用PBS洗涤细胞两次(2000 rpm离心5分钟)收集1-5×10^6细胞。
3. 用去离子水按照1 : 9稀释Binding Buffer(1ml 10×Binding Buffer+9ml 去离子水)。
4. 加入500μL 1×Binding Buffer重悬细胞。
5. 加入5μL AnnexinV-iFluor488混匀后加入5μL PI混匀,室温避光反应15-20分钟。
6. 孵育后将样本置于冰上,准备进行流式检测。