转染试剂 FectinMore™ Transfection Reagent
产品编号 规格 价格 货期
CM001-1.5T 1.5 mL ¥1500.00 现货
CM001-7.5T 5*1.5 mL ¥6000.00 现货
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产品简介
背景描述 FectinMore™ 是经优化设计的针对贴壁 /悬浮细胞的非脂质体阳离子聚合物转染试剂,用于 DNA转染。 FectinMore™ 可与细胞表面的蛋白多糖结合,通过细胞吞饮作用进入细胞,形成的转染试剂-目标核酸 复合体在胞质中释放。FectinMore™ 适合贴壁细胞转染,也能转染一些难转细胞,操作简单,高效低毒。
产品应用 Cell Culture
产品储存/运输
储存 -20℃,有效期两年
运输 蓝冰
产品使用

 DNA 质粒 转染细胞实验 FectinM orem推荐用量  

培养板/

生长面积  (cm2/孔 )

每孔总体积

DNA  /无血清培养

FectinMore

/无血清培养基

96 孔板

0.3

100 μ L

250 ng/10 μ L

0.75 μ L/10 μL

24 孔板

2

500 μ L

500 ng/25 μ L

1.5 μ L/25 μ L

12 孔

4

700 μ L

750 ng/35 μ L

2.25 μ L/35 μ L

6 孔板

9.5

1 m L

1 μg/50 μ L

3 μ L/50 μL

60mm 培养

20

3 m L

2. 5 μg/150 μ L

7. 5 μ L/150 μL

100mm 培养

60

6 m L

5 μg/300 μ L

15 μ L/300 μL

 

步骤 (依据上表以 24 孔板为例 ,  DNA转染)

1、  准备待转染细胞:按照贴壁细胞 5×104/孔的密度接种于 24 孔板中,37 ℃培养过夜。

2、  转染前 30 分钟,将待转细胞更换新鲜无血清或有血清培养基。更换的培养基需预先平衡至室温或37℃。

3  准备 FectinMorem/DNA 复合物:将 0. 5μg DNA 溶于 25μL 无血清培养基中混匀 1. 5 μLFectinMorem 加入另外 25 μL 无血清培养基中混匀 室温 5 分钟后,将后者加入前者中混匀,得到的 50μL 合物室温孵育 15 -20 分钟。

意事项

1) D N A 纯 度 建 议 A 2 6 0/ A 2 8 0 = 1 . 8 - 1 . 9 。

2 )  此 处 使 用  使 O p t i - M E M ™ I  R e d u c e d - S e r u m  M e d i u m 或 O p t i P R O ™  S F M 培 养 基 。

3 )  F e c t i n M o r e ™/ D N A 复 合 物 混 匀 操 作 需 充 分 ,  勿 涡 旋 震 荡 。

4  转染:将上述 FectinMorem/DNA 复合物加入每孔细胞(无血清或有血清细胞培养基 450 μL),复 合物占总体积 1/10,轻柔摇匀。37 ℃孵育 24 -48 小时。如采用无血清培养基,必要时,转染 6 小 后可添加新鲜有血清培养基。

实验数据展示

· 采用转染试剂转染细胞(  转染试剂:DNA=3:1) ,两天后检测蛋白表达情况  。

Proteins expression checked by western blot in specific primary antibody followed by secondary antibody (anti-Mouse IgG(H+L)- HRP).

Proteins expression checked by FACS in specific primary antibody followed by secondary antibody (anti - Mouse IgG(H +L)- FAM).

Proteins expression checked by immunofluorescence (IFA) in specific primary antibody followed by secondary antibody (anti - Mouse IgG -iFluor 594).

 

文献引用
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