3D及类器官培养基质胶 / 3D Cell and Organoid Culturing Gel Kit
产品编号 规格 价格 货期
CM001-2.5CO 120 assasys ¥1500.00 请询
CM001-5CO 240 assays ¥2400.00 请询
CM001-10CO 480 assays ¥4200.00 请询
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产品简介
背景描述 3D细胞及类器官培养水凝胶系统,以合成生物原料仿真人体组织微环境架构而成,质量稳定且胶体硬度可自由调控、简易操作、高培养稳定性、高细胞回收率及高生物兼容性。可应用于三维细胞培养、肿瘤形成实验、肿瘤血3D及类器官培养管生成和侵袭研究等。
产品应用 Cell Culture
产品储存/运输
储存 2-8℃,有效期两年。所有组分开封稀释后应在一周内用完。3D Culturing Gel不建议重复存储使用,以免产品性能受影响。3D Culturing Gel在培养基中2周内可维持其结构稳定。
运输 蓝冰
产品使用

细胞接种及凝胶制备凝胶

1、按照10⁵ -10⁷ cells/mL细胞密度准备0.5mL细胞悬液。

2、将细胞培养板置于冰上预冷。

3、将0.5mL的2X 3D Culturing gel置于37℃水浴锅5-10分钟以便充分溶解。溶解后,将胶与细胞充分混匀后,加入细胞培养板中。

4、5分钟后,加入预冷的 1X Covering Buffer,盖过凝胶顶部。

5、15分钟后,小心将 1X Covering Buffer更换为细胞培养基。

6、培养细胞1至2周。为了保证细胞正常生长,可每两天更换培养基。

 

溶解及球体收集

1、吸除培养基,用1×PBS轻轻冲洗凝胶顶部。

2、吸除1×PBS,加入1X Dissociating Buffer,盖过凝胶顶部,室温下5分钟。

3、轻轻吸取吹打液体直至胶体完全溶解。加入3倍体积1×PBS,然后将培养孔中溶液转移至1.5mL无菌离心管中。

4、1000 rpm离心10分钟,弃上清,收集球体用于后续实验或分析。

5、为了分离单个细胞,将胰蛋白酶- EDTA加入球体中,37℃孵育。轻轻吹打,直至球体解离,加入3倍体积1× PBS。

6、1000 rpm离心5分钟,弃上清,收集细胞用于后续实验或分析。

 

注意事项

1)建议使用24孔板培养细胞,每孔加入20-40 μL凝胶。

2)为了确保移液易操作、凝胶结构均匀,并防止培养过程中凝胶脱落,使用前有必要在37℃的水浴中充分溶解凝胶。

3 )缓冲液在使用前应进行稀释。10X Covering Buffer用无血清DMEM培养基进行稀释,10X Dissociating Buffer 用1 X PBS进行稀释。

4)往培养孔中加入Covering Buffer前,实验者可用移液管尖端轻触凝胶以测试凝胶的形成情况。从凝胶表面收回尖端时不得拔出凝胶线即可。

5)进行肿瘤侵袭实验时,一般建议用0.5X Covering Buffer按照1:14比例稀释 1X 3D Culturing Gel(即3D Culturing Gel稀释15倍)。根据细胞类型调整稀释倍数。另外,为避免在Covering Buffer移除时破坏薄凝胶层,建议将Covering Buffer覆盖凝胶后在4℃下孵育过夜,然后直接将无血清癌细胞悬液加入到Transwell的上室中。

实验数据展示
暂无实验数据
文献引用
暂无参考文献
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